祛寒和胃涂膜剂为一芳香健胃、驱风理气制剂。主要由葛缕子油、75%乙醇及成膜材料组成。葛缕子油含有葛缕酮(carvone)、柠檬烯及β-蒎烯等萜烯类化合物,其中葛缕酮为主要活性成分,且含量高(53%~63%),可作为定量指标。本文以GC法对其进行了含量测定,方法简便、快速。
1 仪器与试药
1.1 仪器
GC-14A气相色谱仪,GC-5A数据处理机(日本岛津);微量进样器1μl。
1.2 试药
葛缕酮对照品(上海香精香料研究所);祛寒和胃涂膜剂(自制);联苯(色谱纯);氯仿(分析纯)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
0.33mm石英毛细管柱CBP20-$25-050,15O℃柱温;氢火焰离子化检测器,检测器温度2OO℃;氮气(99.999%),分流比2O:1;氢气60ml/min;空气500ml/min;进样体积1μl。
2.2 溶液的配制
2.2.1 内标溶液的配制
精密称取联苯适量加氯仿制成1.0073 mg/ml内标液(I)和0.1007 mg/ml内标溶液(I)。
2.2.2 对照品溶液的配制
精密称取葛缕酮对照品50mg,置10ml量瓶中;加内标液I稀释至刻度,再分别精密吸取该液10,15,20,25,50μl于1ml量瓶内,分别用内标液II定容至刻度,得标准对照品溶液。
2.2.3 样品溶液的制备
精密吸取涂膜剂1.0ml,涂布于一洁净玻板上,使成约0.1mm厚的药膜,晾干,揭下,装入滤纸筒置索氏提取器中,用氯仿加热回流提取2h后,转移至5Oml量瓶中,精密加入内标液I 5.0ml,再用少量氯仿洗涤,洗液并入量瓶中,定容至刻度。
2.3 标准曲线的绘制
取对照品溶液,各进样1μl,取3次平均值,以葛缕酮与联苯(内标)的浓度比(Ci/Cφ,)为纵坐标,(Ai /Aφ)为横坐标,线性回归方程y=1.33X-1.7×10-3。,r=0.9999( n=5),线性范围25~125μg。
2.4 精密度试验
取75μg/ml的葛缕酮作精密度试验,分别按“2,1”色谱条件操作,连续进样1O次,测得RSD为1.4%。
2.5 回收率试验
精密吸取该制剂1.0 ml,定量加入葛缕酮对照品,混匀,按照2.2.3及2.1项下的方法操作,连续取三次.
2.6 重复性试验
精密吸取批号为9503312制剂1.0 ml,分别按照2.2.3及2.1项下的方法操作,连续进样三次.
2.7 样品测定
精密吸取该制剂1.0 ml,按照2.2.3及2.1项下的方法进行含量测定。
3 讨论
索氏提取法,可避免了萃取时的乳化和难以分层的干扰,且成分提取完全。