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质谱沙龙第十一期活动报道
中国色谱网(2008-9-5 15:44:00)   文章作者:未知
 

      2008年8月31日下午,质谱沙龙第十一期活动在西苑医院实验楼举行。会议有来自二炮总医院、西苑医院、医科院药物所、医科院药植所、朝阳医院、北大医学院、北医三院、空军总医院、中科院过程工程所、AB公司等老朋友,还有来自中科院、中科院微生物研究所、艾杰尔科技公司等新朋友。

      应大家要求,AB公司首先请出有几十年质谱、色谱分析经验的高级应用工程师赵贵平 老师,总结质谱分析的经验,并现场为大家答疑解惑。赵贵平 老师以前在北京化工大学工作,从80年代开始就从事各种分析检测、尤其是质谱的分析工作。加盟公司以来,有着深厚质谱背景的赵老师,凭借丰富的实际经验、严谨的工作态度、为用户服务、钻研新方法的精神,帮助用户开发了很多前沿的方法,解决了用户很多应用的难题,获得了众多用户的好评。要想把液质联用各种复杂的实际问题和经验解决办法,浓缩在这么短的时间里是非常不易的。赵老师从ESI的最基本原理讲起,主要介绍液质联用遇到的常见问题,并边讲边回答大家的问题。

 

这里撷取一些要点总结:

(1)理解电喷雾原理:ESI在溶液中电离,而APCI是在气相中电离,样品的性质不同就会产生不同的电离效果。那什么样的物质可在溶液中电离?一般笼统以极性、非极性区分,广义上采用路易斯酸/碱的电离,比如含有N原子、-COOH、-OH基团的化合物,通常ESI会电离。

(2)为什么要用梯度?有些用户为节省时间,液质联用喜用短柱、等度。但赵老师还是建议:不管是作单一的还是多个化合物的分析,液质联用尽量用梯度洗脱,一来可以使质谱峰形更窄、灵敏度更高;更重要的是可以降低成本:比如对一根新色谱柱,走等度可走1000针;而梯度可以到2000针。梯度方法里,柱子被清洗得更干净。

(3)液质联用和液相的流速不同。ESI最佳流速为0.2~0.5 mL/min,很多情况下超过0.5 mL/min离子源腔体会结雾,这和色谱的常用流速不同,在选柱子方面也要考虑;现在很多公司也专门出了适用于质谱的色谱柱/窄径柱,如2.1×50×150 mm。在这里还特别指出AB公司在离子源设计方面、有利于大流速分析的特点,因为AB公司的TurboV™离子源有专利的两路辅助雾化气,可以在大流速下仍快速地去溶剂。

(4)如何选择母离子:大家很多人在一级质谱中见到的M+H+或M+Na+(注:下文中M+K+和M+Na+情况相同),有时M+Na+峰强度要高于M+H+峰,有些用户干脆选择更强的M+Na+峰做二级质谱,却会常遇到找不到子离子的烦恼,比如子离子峰不稳定或灵敏度太差。80%的样品找不到M+Na+峰的子离子,而M+H+峰一般都能找到很稳定的子离子,峰也很漂亮。只有很少的一些结构可以使用M+Na+峰做二级质谱。这其中的原因,赵老师说他自己这一段也在研究和探索规律。

      有时,M+H+或M+Na+峰的子离子都有,也建议大家尽量选择M+H+,因为,M+Na+峰的子离子虽然在直接进样的时候可以看到,但在做LC-MS时一般不稳定,比如硝基呋喃的AOZ代谢物,直接进样M+Na+峰远高于M+H+,但若选M+Na+,二级质谱极不稳定,无法定量;而选择M+H+做二级质谱就很好。当然,也有特例的情况:比如,阿维菌素的于M+H+或M+Na+,做二级质谱都挺好。

      因此建议,只要能用M+H+的尽量用M+H+,M+H+若实在做不好,再去尝试一下M+Na+。

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信息来源:分析测试百科
 
 
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