摘要:采用TLC和HPLC两种方法鉴别菟丝子(Cusruta.Chinensis Lam.)和南方菟丝子(C.australis R.Br.)。TLC采用聚酰胺薄层层析,MeOH-HOAc-H2O和CHCl3-MeOH-HOAe两种溶剂二次展开。HPLC采用Hypensil-ODS柱,MeOH-0.025 mol/L H3PO4为流动相,流速1.0ml/min,检测波长360nm,柱温40℃ 。两种方法鉴别特征均很显著,且操作简便,重现性好。
关键词:菟丝子;南方菟丝子;TLC;HPLC;品种鉴别
菟丝子为常用中药,目前其药材来源主要为旋花科菟丝子属植物菟丝子Cuscuta Chinensis Lam.、南方菟丝子C.atsstralis R.Br.及金灯藤C.japonica Choisy.等的干燥成熟种子,其中前二者质佳,习称为“小粒菟丝子”。现代研究表明,两种小粒菟丝子外观性状、组织构造、化学成分及药理活性等均极为相似。文献曾采用薄层色谱法、紫外光潜法、凝胶电泳等多种方法对其进行鉴别,但鉴别特征不甚明显,或是操作过程复杂,在实际应用中有一定的局限性。
两种小粒菟丝子中均含有金丝桃甙、山柰酚等多种黄酮类成分。本文针对此类成分,采用TLC和HPLC两种色谱技术进行了两种小粒菟丝子的品种鉴别研究,建立了简便、直观的鉴别方法。
1 材料、仪器与试剂
聚酰胺-6薄膜(浙江台州市路桥四青生化材料厂);254nm紫外分析仪。HP-100型高效液相色谱仪.配有二极管阵列检测器,四元梯度泵,柱恒温箱。金丝桃甙和山柰酚对照品由作者自制。水为超纯水.其余试剂均为分析纯。
2 药材
所用药材均由笔者采集或栽培.并根据原植物形态及显微组织特征鉴定学名。
3 对照品溶液的制备
取金丝桃甙、山柰酚对照品,分别加甲醇溶解,制成1mg/m1的溶液。
4 TLC分析
4.1 供试品溶液的制备取药材粉末1.0g(过60目筛),加甲醇40 m1,加热回流30min,滤过,滤液浓缩至5m1,作为供试品溶液。
4.2 层析条件 薄层板:聚酰胺-6薄膜;展开剂I:MeOH-HOAc-H2O(6:l:3),上行展开7cm;展开剂Ⅱ:CHCl3-MeOH-HOAc(10:4:1),上行展开4cm;显色剂:1%三氯化铝乙醇溶液,于254nm紫外光下观察荧光。
4.3 样品分析吸取供试品溶液和对照品溶液各2μl,分别点于同一聚酰胺-6薄膜上,先用展开剂I展开7cm.取出,晾干,再用展开剂Ⅱ展开4cm,取出,晾干,显色,于紫外灯下观察荧光。
4.4 结果
参考文献
1 郭澄,等,七种菟丝子的薄层层析鉴别研究,基层中药杂志,1992,6(3):12