摘要  目的：测定青翘与老翘中连翘苷含量。方法：。双波长薄层扫描法。结果：青翘中连翘苷含量为0.076%；老翘中仅为0.012%。与报道的青翘中连翘酯苷含量高于老翘的实验结果相同，结论：本文结果与文献报道的就抗菌效价而言青翘优于老翘的结论吻合。目前市售药材青老翘混杂，有必要进行深入研究，确定合理的采收期。
关键词　连翘；连翘苷；青翘；老翘；薄层扫描
　　 连翘［Forsythia suspen (Thunb) Vahl］为木樨科连翘属植物连翘的干燥果实。为常用的清热解毒中药。连翘的化学成分为挥发油，连翘苷等木脂素类，齐墩果酸等三萜酸类等［1］。其中连翘苷具有较强的抑菌作用，并能抑制CAMP、磷酸二酯酶的活性［2］。连翘根据其果实成熟程度，商品中有青翘和老翘之分。目前有关青翘和老翘中连翘苷含量的比较研究尚未见报道。为此，较青翘和老翘之间的异同，保证连翘的药用质量及临床疗效，本文采用薄层扫描法，进行了青翘和老翘中连翘苷的含量测定，实验结果表明青翘和老翘中连翘苷含量差异较大，青翘中连翘苷含量为0.078%；而老翘仅为0.013%。与文献报道的青翘中连翘酯苷含量高于老翘的实验结果相同［3］。
1　仪器与试药
　　 CS-930薄层扫描仪(日本岛津公司)；PBQ-Ⅰ型薄层自动铺板器(重庆南岸新力实验电器厂)；定量毛细管(美国Drummond厂)。
　　 连翘苷对照品(中国药品生物制品检定所)；连翘药材(济南药材站，经本所彭广芳研究员鉴定符合药典规定)。甲醇、乙醇、氯仿、冰醋酸等试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　药材样品供试液及对照品溶液的制备
　　 药材样品供试液的制备：精称青翘及老翘药材各2g,置100ml圆底瓶中， 精密加入50ml水，精密称重，电热套加热回流提取1.5h,放冷，补足损失的水份，过滤，弃去初滤液，精取续滤液25ml,用氯仿提取4次(20,20,10和10ml),合并提取液，用水洗涤3次，弃去水液，水浴挥去氯仿，残渣以乙醇溶解，并定容至1ml量瓶中，作为各样品供试液。
　　 对照品溶液的制备：精取连翘苷对照品2mg,加甲醇溶解，转移至2ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，备用。
2.2　层析条件
　　 硅胶G薄层板：取硅胶G加入0.2%的CMC-Na，自动铺板器铺成0.5mm(500μm)的薄层板，晾干，于105℃活化1h,置干燥器中备用。
　　 展开剂；氯仿-甲醇-冰醋酸(85∶12∶0.5)。
　　 显色剂：5%香兰素浓硫酸。
2.3　薄层层析
　　 精密吸取上述药材样品供试液及连翘苷对照品溶液各2μl,点于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开10cm,晾干，显色，烘干，连翘苷显鲜紫色斑点,Rf值为0.45,与其它成分斑点得到较好的分离。薄层图谱见图1。（略）
2.4　薄层扫描定量
2.4.1　仪器扫描条件：测定波长λS=540nm,参比波长λR=700nm;反射锯齿形扫描，线性参数SX=3,狭缝1.2mm×1.2mm,扫描速度20mm/min。
2.4.2　稳定性试验：精密吸取对照品溶液点于同一硅胶G薄层板上，层离，挥干溶剂，立即扫描，再每隔20min扫描一次，结果表明，连翘苷斑点在1h内稳定。
2.4.3　精密度试验：同一斑点连续扫描5次，测得RSD=0.88%;同一薄层板5个相同量的各对照品斑点，测得面积，计算RSD=1.79%;测定5块不同薄层板相同量的对照品斑点，其RSD=2.74%,具有较好的精密度。2.4.4　标准曲线的绘制：精密吸取连翘苷对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0和5.0μl,分别点于同一薄层板上，按既定条件层离扫描，以点样量为横坐标，测得斑点峰面积值为纵坐标，作图。回归方程:Y=1047.3X-57.5,r=0.9998。结果表明，连翘苷点样量在1～5μg范围内与其峰面积值呈线性关系。
2.4.5　样品测定：按上述方法测得各样品供试液中连翘苷含量，结果见表1。

表1　青翘和老翘中连翘苷含量测定(n=3)

2.4.6　回收率试验：精密称取青翘药材1g,共取3份，分别加入连翘苷对照品0.3mg,依法测定连翘苷含量，计算回收率，测得结果分别为94.57%,97.31%和96.49%。
3　小结与讨论
3.1　实验结果表明，青翘和老翘中连翘苷含量差异较大，青翘中连翘苷含量为0.076%,而老翘中仅为0.012%。与文献报道青翘中连翘酯苷含量高于老翘的实验结果相同。另有文献报道，就抗菌效价而言青翘优于老翘［3］。而目前市售连翘药材往往青老翘混杂，其中大多为老翘，青翘仅占1/10或更少。鉴于连翘为常用中药，目前以连翘为主要的中成药就有数余种，因此，有必要对连翘进行深入研究，以保证药材质量和临床疗效。
3.2　目前有关连翘苷的含量测定方法报道较少。本文采用的薄层展开及显色系统，方法简便、快速、灵敏度高、重现性好，可作为连翘药材及含连翘制剂的质控方法。在连翘苷提取分离中，采用氯仿进行提取，再用水洗去氯仿提取液中水溶性杂质，可有效地去除干扰，薄层效果较好。
参考文献
　[1]　刘东雷，李会轻，徐绥绪.连翘属植物化学成分的研究进展.沈阳药科大学学报，1995，12(4)∶301.
　[2]　都恒青，王升启，李朝民.连翘叶的化学成分.中草药，1986，17(2)∶7.
　[3]　丁冈，刘延泽，等.中药连翘及其同属植物的研究近况.中药材，1994，17(10)∶42.