摘要：目的：建立肉桂油中桂皮醛的含量测定方法和鉴定挥发性化学成分。方法：气相色谱法，3 mm×4 m不锈钢柱，10%PEG-20 M为固定液，Chromosorb WAW 60～80目担体，FID检测器，柱温190 ℃；气质联用，以HP-5毛细管柱，柱温起始120 ℃保持5 min后5 ℃.min-1升温至150 ℃保持7 min，检测质荷比范围10～425。结果：桂皮醛在2～10 mg.mL-1范围内具良好线性关系，平均回收率为98.3%～101.6%，RSD≤1.3%，气质联用鉴定了39种化合物。结论：方法简便，快速，准确，可有效排除其它成分的干扰。
关键词 肉桂油 桂皮醛 气相色谱法 气质联用
肉桂油是樟科植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥枝、叶经水蒸气蒸馏得到的挥发油，主要成分为桂皮醛(Cinnamic aldehyde)。现行质量标准中国药典(1995年版)［1］采用加入过量的亚硫酸氢钠，桂皮醛与亚硫酸氢钠形成白色沉淀物，该沉淀物溶于水层而与油层分离，读取油层体积计算含量，方法简单，但周期长，误差大，且当样品中混有其它醛类时，使用该法测得的结果偏高。本文采用气相色谱法测定其含量，方法简单、快速，可排除其它杂质的干扰，本文还应用气质联用对肉桂油中挥发性成分进行鉴定。
1 仪器与试药
日本Shimadzu GC-17A气相色谱仪；C-R6A数据处理机；美国HP 5890气相色谱仪；HP-MS检测器；NBS75K.质谱数据库。无水乙醇(AR)；桂皮醛对照品(中国药品生物制品检定所提供)；肉桂油(市售，产地广西)。
2 溶液制备
2.1 对照品溶液的配制 精密称取桂皮醛对照品约0.1 g置25 mL容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度。
2.2 样品溶液的配制 精密称定样品约0.05 g置10 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
3 实验条件及其考察
3.1 色谱条件
3.1.1 填充柱气相色谱条件 4 mm×3 m不锈钢柱，10%PEG-20M固定液，Chromosorb WAW 60～80目担体，FID检测器，柱温190 ℃，检测器温度230 ℃，载气：氮气60 mL.min-1，氢气、空气压力：50 kPa。
3.1.2 气质联用系统条件 HP-5(5%苯取代甲基硅酮)毛细管柱(0.25 mm×30 m)，载气：氦气，分流比40∶1，流量1.0 mL.min-1，柱温：起始120 ℃保持5 min后以5 ℃.min-1升温至150 ℃保持7 min,检测质荷比范围10～425，离子源温度300 ℃，倍增电压1 500 eV。
3.2 线性关系考察 精密称取桂皮醛对照品0.5 g置25 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度作对照品储备液，分别精密量取1，2，3，4，5 mL于10 mL量瓶，加无水乙醇稀释至刻度，分别吸取3 μL，注入气相色谱仪中，记录色谱，以样品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，作回归曲线，回归方程(n=3)为：
Y=3.0×104X-5.3×102 r=0.999 9
桂皮醛在2～10 mg.mL-1范围内具良好的线性关系。
3.3 稳定性试验 精密吸取样品溶液在0，1，2，4，6，10 h进样，结果峰面积RSD为1.29%，表明样品在10 h内稳定。
3.4 重现性试验 取同一批样品，按样品测定法依法测定8次，结果平均含量为79.7%，RSD为0.88%。
3.5 加样回收率试验 分别精密称取已测定含量的同一批号肉桂油样品6份，每份约0.03 g，精密加入桂皮醛对照品各约0.03 g于10 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，分别吸取3 μL注入气相色谱仪中，记录测定色谱，每份样品测定3次，结果加样回收率为98.3%～101.6%，最大RSD为1.3%。
3.6 样品测定结果 分别吸取对照品溶液和供试品溶液3 μL注入气相色谱仪中，记录色谱结果，计算；另取同批样品10 mL，按中国药典1995年版方法测定，计算。结果见表1，色谱图见图1。（略）
表1 样品测定结果
|
批号 |
气相色谱法(n=4) |
药典法 |
|
含量/% |
RSD/% |
含量/% |
|
940607 |
80.8 |
1.34 |
89.3 |
|
940621 |
80.3 |
1.06 |
89.1 |
|
950210 |
75.0 |
0.83 |
89.3 |
|
950315 |
79.6 |
1.27 |
89.1 |
|
951006 |
78.9 |
0.91 |
90.2 |
|
807842 |
77.0 |
1.56 |
84.2 |
|
807832 |
79.9 |
0.00 |
88.0 |
|
807846 |
53.4 |
1.98 |
78.6 |
|
980510 |
80.0 |
0.88 |
79.6 |
|
980520 |
80.9 |
1.22 |
90.0 |
3.7 气质联用分析 取精油0.2 μL，按气质联用条件直接进样，结果见表2，总离子流图见图2。在上述条件下，从肉桂油中分得41个成分，鉴定了39个成分，占全精油的95.1%。
表2 肉桂油挥发油化学成分
|
编号 |
保留时间/min |
成 分 |
归一化含量/% |
|
1 |
1.71 |
苯乙烯(Styrene) |
0.07 |
|
2 |
1.98 |
苯甲醛(Benzaldehyde) |
0.03 |
|
3 |
2.03 |
伞花烃(Cymene) |
0.98 |
|
4 |
2.36 |
苯甲醇(Benzyl Alcohol) |
0.02 |
|
5 |
2.46 |
2-羟基苯甲醛(Benzaldehyde,2-hydroxy) |
1.01 |
|
6 |
2.47 |
苯乙醛(Benzeneacetaldehyde) |
0.34 |
|
7 |
2.65 |
甲酸苯甲酯(Formic acid,phenylmethyl ester) |
0.08 |
|
8 |
2.67 |
苯乙酮(Acetophenone) |
0.06 |
|
9 |
3.09 |
苯乙醇(Phenylethyl alcohol) |
0.14 |
|
10 |
3.62 |
苯丙醛(Benzenepropanal) |
0.09 |
|
11 |
3.73 |
薄荷醇(Menthol) |
0.10 |
|
12 |
3.82 |
甲酸苯乙酯(Acetic acid,2-phenylethyl ester) |
0.15 |
|
13 |
3.85 |
萜品烯醇-4(Terpine-4-ol) |
0.09 |
|
14 |
4.23 |
水杨酸甲酯(Methyl salicylate) |
6.17 |
|
15 |
4.54 |
2-甲基苯并呋喃(Benzofuran,2-methyl) |
0.13 |
|
16 |
4.59 |
2-苯丙醛(2-Phenylpropanal) |
0.05 |
|
17 |
4.61 |
苯亚甲基苯甲醛(Benzylidenemalonaldehyde) |
0.12 |
|
18 |
5.02 |
2-甲氧基苯甲醛(Benzaldehyde,2-methoxy) |
0.93 |
|
19 |
5.22 |
乙酸苯乙酯(Acetic acid,2-phenylethyl ester) |
0.09 |
|
20 |
6.28 |
肉桂醛(Cinnamaldehyde) |
67.21 |
|
21 |
7.08 |
肉桂醇(Cinnamyl alcohol) |
1.02 |
|
22 |
7.15 |
苯丙醛(Benzenepropanal) |
0.09 |
|
23 |
8.05 |
丁香酚(Eugenol) |
0.99 |
|
24 |
8.22 |
咕巴烯(Copaene) |
0.23 |
|
25 |
8.32 |
α-荜澄茄烯(α-Cubebene) |
0.11 |
|
26 |
9.04 |
香草醛(Vanillin) |
0.30 |
|
27 |
9.37 |
石竹烯(Caryophyllene) |
5.58 |
|
28 |
10.05 |
苯并呋喃(Benzofuran) |
0.34 |
|
29 |
10.10 |
乙酸肉桂酯(2-Propen-1-ol,3-phenyl-,acetate) |
3.47 |
|
30 |
10.55 |
肉桂酸乙酯(2-Propenoic acid,3-phenyl-,ethyl ester) |
0.27 |
|
31 |
10.67 |
β-荜澄茄烯(β-Cubebene) |
0.07 |
|
32 |
11.03 |
肉桂酸(2-Propenoic acid,3-phenyl-) |
0.23 |
|
33 |
11.64 |
γ-杜松烯(γ-Cadinene) |
0.07 |
|
34 |
11.87 |
δ-杜松烯(δ-Cadinene) |
0.05 |
|
35 |
12.40 |
2-甲氧基肉桂醛［2-Propenal,3-(2-methoxyphenyl)-］ |
7.40 |
|
36 |
13.16 |
橙花叔醇［cis-(+)-Nerolidol］ |
0.25 |
|
37 |
13.91 |
氧化石竹烯(Caryophyllene oxide) |
0.50 |
|
38 |
15.19 |
9氢-芴醇-9(9H-Fluoren-9-ol) |
0.06 |
|
39 |
15.93 |
金刚烷(Adamantane) |
0.22 |
4 结果与讨论
由气质联用分析结果可知肉桂油中含有苯甲醛、香草醛、2-甲氧基肉桂醛等醛类，所有的醛类和甲基酮及环酮均与亚硫酸氢钠发生反应［2］，引起药典法含量测定结果偏高。
桂皮醛对照品较不稳定，含量测定用新开封的对照品，对照品溶液应新鲜配制。
李玲玲（厦门市药品检验所 厦门 361012）
袁文杰（厦门市药品检验所 厦门 361012）
参考文献
1，中国药典.1995.一部：112
2，沈阳药学院主编.有机化学.北京：人民卫生出版社，1981.158
