摘要:复方蛤青注射液由蟾蜍、黄芪、前胡、苦杏仁等9味药材制成,具有补气敛肺、止咳平喘等功效,用于肺虚咳嗽,气喘痰多以及老年慢性气管炎等的治疗。其中黄芪是处方中的主药之一,黄芪甲苷又是黄芪的主要有效成分,因此我们采用薄层扫描法测定了复方蛤青注射液中黄芪甲苷的含量。
关键词:复方蛤青注射液;黄芪甲苷;薄层扫描法
1 仪器与试药
DESAGE CD60双波长薄层扫描仪(德国)高效硅胶G薄层预制板(天津思利达),定量毛细管(美国Drunmond),BP-211D电子天平(德国)。
黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:0781.200109,供含量测定用);复方蛤青注射液(山西华禹制药厂,批号:020503,020704,020830,020920,021015,021030,021104),其它试剂均为分析纯。
2 薄层及扫描条件
高效硅胶G薄层预制板用之前100℃干燥并置干燥箱备用;展开剂:氯仿-甲醇-水(13:6:2,10℃以下过夜,取下层);显色剂:10%硫酸乙醇溶液,均匀喷至湿润,105℃加热至斑点清晰,放冷,用同样大小玻板密封; λs=530nm,λR=700nm,双波长线性扫描,狭缝0.04mm×4mm,Sx=3。
3 方法与结果
3.1 对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品9.10mg,甲醇定容至20mL量瓶中,制成每lmL含0.455mg的溶液,作为对照品溶液。
3.2 供试品溶液的制备 取复方蛤青注射液50mL(25支),水浴条件下浓缩至约25mL,置80mL分液漏斗中,用水饱和正丁醇萃取4次(20,20,20,10mL),据2000版药典方法用氨试液洗涤2次(20,20mL),弃去氨液;蒸干正丁醇溶液,残渣加水使溶解,放冷,通过D101大孔树脂柱(内径1.5cm,长18cm),先用水50mL洗脱,弃去水液;在用40% 乙醇30mL洗脱,弃去40%乙醇洗脱液;继用70%乙醇60mL洗脱,收集洗脱液蒸干,用甲醇溶解,转移至2mL量瓶,甲醇定容至刻度,摇匀,作为供试品溶液备用。
3.3 标准曲线和线性范围 精密吸取对照品溶液l,2,3,4,5,点于同一高效硅胶G 薄层板上,按上述条件展开,显色,扫描测定。以峰面积积分值为横坐标,以点样量为纵坐标绘制标准曲线并进行回归。结果表明,黄芪甲苷在0.455μg~2,275μg之间线性关系良好,回归方程为y=192.69+2.38X.r= 0.988。
3.4 稳定性实验 精密吸取同一供试品溶液10μL,点于高效硅胶G薄层板上,依法展开,显色,每隔30min扫描1次,连续测定6次。RSD=1.82%。测定结果表明,斑点在3h内稳定性良好,斑点峰面积积分值基本不变。
3.5 稳定性与精密度实验 精密吸取上述黄芪甲苷对照品溶液2μL.点于同一高效硅胶G薄层板上,共5个点,依法展开,显色,扫描测定,RSD=3.04%;对同一斑点连续扫描5次,RSD=2.23%。
3.6 加样回收率实验
3.7 供试品测定 精密吸取供试品溶液10μL,和对照品2μL,分别交叉点于同一高效硅胶G薄层板上,依法展开,显色后,扫描测定。
4 讨论
4.1 关于测定含黄芪甲苷试样的前处理步骤中,对正丁醇萃取液,有的用氨试液洗涤,有的用1%NaOH溶液洗涤。作者随机选取3批样品分别采用上述2种不同方法处理,做平行对比试验,结果显示:2种处理方法对结果无明显影响。
4.2 作者曾尝试用HPLC(BECKMAN GOLD SYSTEM)法测定复方蛤青注射液中黄芪甲苷的含量,但由于其含量较低和黄芪甲苷在紫外区属末端吸收类型等原因导致无法准确测定其含量。
4.3 从结果来看,方法简便可行,结果准确,可以作为该制剂的含量测定方法。
参考文献:
[1] 中华人民共和国药典[S].北京:化学工业出版社,2000年版(一部):249.
[2] 王洪志,刘俊红,朱棣华,等.薄层扫描法测定益气养血冲剂中黄芪甲苷含量【J】.中草药,2001,32(8):703.704.