载入数据中:
 
 
首 页 色谱商城 产品库 企业库 色谱资讯 色谱技术 色谱展会 色谱人才 资料下载 色谱词典 色谱论坛
 您好!您现在的位置: 中国色谱网 -> 色谱分析 -> 正文
·基础入门 ·仪器选用 ·行业标准与法规 ·维修保养 ·色谱分析 ·色谱试剂 ·色谱论文 ·相关刊物
用高效液相色谱法分析植物组织中多胺含量技术的探讨
中国色谱网(2008-4-23 10:42:22)   文章作者:未知
 

    多胺是植物体内的具有生理活性的一类有机小分子物质,主要有腐胺(putrecine,put)、尸胺(cadecine,cad)、亚精胺(spermidine,spd)与精胺(spermine,spm)。它们与植物的生长发育关系密切,参与植物细胞分裂、DNA的凝聚及激素的调控[1]等。在环境胁迫下,植物体内大量的积累多胺类物质,在稳定细胞膜、核酸及蛋白质等大分子物质的构象有重要的作用。多胺在人体内也大量存在,并与人类健康息息相关[2] 。饮食是人体内多胺的重要来源之一[3],准确、快速地检测植物组织中的多胺越来越受重视。
    由于多胺属脂肪族直链胺类,以前主要用氨基酸分析仪、纸电泳等方法测定[4],不仅样品回收率低而且检测灵敏度也不高。目前多用衍生化的方法,将多胺的一、二级氨基接上荧光或紫外有吸收的基团,通过薄层或液相色谱分离检测,常用的衍生试剂有丹磺酰氯、苯甲酰氯、苯磺酰氯及荧光胺类等[4~8]。
自从1972年Redmond和Tseng [5]采用苯甲酰化的方法以来,色谱工作者对该方法进行了不断的改进,已经成为较为成熟的检测植物体内多胺的方法。然而在许多细节方面,如反应的时间、副反应的干扰、样品的保存及分离条件的进一步优化等还有很多工作要做。
实验部分

2. 1 仪器和试剂 Waters 515泵,2487双波长紫外/可见检测器。腐胺、亚精胺为Fluka产品,精胺为Sigma产品,甲醇为色谱纯,水为超纯水,其它试剂为国产分析纯。
2. 2 色谱条件 色谱柱:NovapakC18柱(Waters,150×3.9mm,4um)。 流动相:甲醇:水(60:40,v/v),检测波长为230nm,流速0.7ml/min,柱温30℃,Breeze色谱工作软件。
2. 3 材料处理 1.0~2.0g,加入4ml 预冷的5%高氯酸(v/v)冰浴研磨,冰浴浸提1小时后离心(15,000g,30分钟,4℃)。取上清500ul加入10ml 带盖塑料离心管,加入7ul苯甲酰氯,再加入1ml 2M NaOH,涡漩20s后在37℃水浴反应20min。加入2ml 饱和NaCl溶液,混匀后用2ml 乙醚萃取,取1ml 醚相真空干燥,用100ul甲醇涡旋后过0.45um 的滤膜,取10ul进样。
2. 4 标准曲线制作 标准品配成1mmol/L浓度的贮液,各取40ul按2.3的方法进行苯甲酰化。分别取苯甲酰化后的多胺标准液0.03,0.06、0.12、0.25、0.50、0.75、1.0nm/10ul进样,以面积对进样量作曲线。
参考文献
1 赵福庚,刘友良.高等植物体内特殊形态多胺的代谢及调节.植物生理学通讯,2000,36(1):1~5
2 Tiburcio A F, Altabella T, Flores D et al. Manipulation of polyamines in food plants:chemical
and transgenic approaches,In :Bardóce S,White A(eds).Polyamines in Health and Nutrition. Klvwer Academic Publishers.1999,161~176
3 吉晓佳,刘友良.植物源食品多胺的作用及其调控.植物学通报(印刷中)
4 Nikolaus S.Thin-layer chromatography and thin-layer electrophoresis of polyamines and their
derivatives,In:Tabor H,Tabor CW(eds). Polyamines.New York:Academic Press,1983,3~9
5 Redmond JW and Tseng A.High-press liquid chromatographic determination of putrescine,cadaverine,spermidine and spermine .J of chromatography.1979,170 ,479- 481.
6 Flores HE and Galston AW.Analysis of polyamines in higher plants by high performance liquid chromatography.Plant physiol.1982,69:,701-706
7 吴少伯,郭枫.水稻胚和胚乳中多胺高效液相色谱分离.色谱,1989,7(6):389~391
8 杜军英,孙秉庸,陈兆珍等.OPA—巯基乙醇柱前衍生反相高效液相色谱法测定生物组织中多胺含量.解放军高等专科学校学报,1997,(1):53


信息来源:药物分析网
 
 
发表评论
密码:  匿名评论
            
最新评论  (显示最新5条)

相关新闻
·吹扫捕集在样品前处理中的应用
·色谱常见问题问答
·选定毛细柱的四个基本参数
·样品制备和HPLC、LC/MS方法开发技术交流会
·气相色谱法在环境科学中的应用
·安谱2004年第二期H P L C技术培训
·德祥科技举办美国OI色谱产品应用方法巡回讲座-杭州站
·HPLC的两个使用问题
·HypersilTM GOLD高效液相色谱柱
·蔓荆子提取物的有效成分研究及其含量测定
 
免责声明:
1、本文系本网编辑转载,转载目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责。
2、如涉及作品内容、版权和其它问题,请在30日内与本网联系,我们将在第一时间删除内容或提供稿费!
 
 
  技术搜索  
关 键 字:
 
  图片新闻  
世创公司-意大利HTA自动进样器中国总代理
郑筱萸被执行死刑
第57届中国实验室技术及装备交易会展览馆大门口
  热门推荐  
·先睹为快!《中国药典》2005
·转载:分析化学、药剂学、天
·色谱基础,值得参考哦
·色谱常见问题问答
·HPLC的两个使用问题
·《色谱通讯》第三、四期电子
·色谱通讯2005第一期
·色谱常见十四种使用问题的详
·国内、外主要分析化学及其相
·样品制备和HPLC、LC/MS方法开
·色谱通讯第二期
·高效液相色谱法同时测定食品
·ASE快速溶剂萃取—解决固体、
·反相高效液相色谱法测定米根
·选定毛细柱的四个基本参数
更多>> 
  推荐专题  
·化工企业爆炸事件
·国务院发布食品药品安全十一五
·我国食品实行QS认证
·纯正堂维C银翘片
·液质技术小分子应用专题
更多>> 

关于我们 | 广告服务 | 会员服务 | 网刊宣传 | 网站建设 | 法律声明 | 友情链接 | 联系我们 | 网站地图 | 网站帮助

服务热线:0571-28905296 传真:0571-28905256 意见与建议
中国色谱网 版权所有©1999-2010