硬酯酸单甘酯是一种应用广泛的食品乳化莉．在食品添加剂上具有很好的应用前景。单甘酯粗产品中的双甘酯的乳化能力只有单甘酯的百分之一， 所以单甘酯产品质量的好坏，取决于单甘酯含量的高低。但对单甘酯的定量分析， 迄今为止， 国内未见有准确、快速有效的方法报道。传统的做法是采用化学分析法，通过氧化α单甘酯的邻位羟基， 来涮出单甘酯的含量。该方法对β位单甘酯就无能为力了，而β位单甘酯在单甘酯的合成中是必然存连盼， 因此，用化学方法来确定单甘酯的含量， 不但操作繁杂， 试剂消耗多，而且偏差大，需要寻求一种更为有效的分析方法，以适应单甘酯的生产和发展。针对单甘酯粗产品中一般含有甘油， 单甘酯、双甘酯和三甘酯， 且它们的分子量之间的差别比较大，而凝胶色谱法可以用来分离不同大小分子量的物质 本文采用这一方法，实现了单甘酯的定量分析。
    一.仪器和药品
    Waters 150C 液相色谱仪。
    Water 740数据处理仪。
    四氢呋喃：C．P．或A．R．， 用钠干燥，蒸馏备用。
    氯 仿：A．R．广州溶剂厂产品
    丙 酮：A．R．广州溶剂厂产品
    粗单甘酯：90%以上，丹麦进口。
    硅 胶：层析用60～200目，上海产。
    硅胶薄板：自制。
    二、单甘酯标准样品的制备
    要进行定量分析，首先得有标样， 国内甚至国外都没有单甘酯的标样出售，我们能够得到的最高含量的样品是丹麦进口的，其含量只有90％上，通过摸索，我们应用硅胶柱层析法，从粗单甘酯中精制出高纯度的单甘酯。
    1．薄板条件的选择
    进行柱层析前，利用薄板层析米选择柱层析的溶剂系统。经过试验，由95％体积的氯仿和5％体积的丙酮组成的溶剂系统，能在硅胶薄板上将单甘酯、双甘酯、三甘酯分开 。
    2．柱层析分离收集单甘酯
    以上面确定的溶热系统作为洗脱剂，称取硅胶100克， 用湿法填充于直径2.2厘米的玻璃层析柱中，得一均匀的硅胶柱。在柱的上端加入3克用冼脱剂溶解的单甘酯(用长滴管均匀加入)，流速控制于每秒三滴左右，用5O毫升小锥瓶收集冼出液， 每收集25毫升换一小锥瓶， 连续收集500毫升左右，然后．薄层板逐一检验．确定哪些小锥瓶中只各有单甘酯。实验过程中，我们发现，在这样的溶剂系统下，单甘酯的溶解度随温度变化很大，这为我们对样品进抒鱼结晶提出了条件。为确保得到高纯度的单甘酯，我们对柱层析得到的单甘酯重结晶一次。纯化前后的色谱图对比。
    我们对纯化的样品进行了必要的仪器分析(红外光谱．核磁共振．元素分析)，结果表明该样品是很纯的，可以作为标样。
    三、单甘酯的色谱分析
    经过一系列的探索试验，应用下面的实验条件能将单甘酯混合物很好分离，其条件是色谱柱u-styragel 100A． u-styragel 1000A串联
    温度：室温
    流速： l毫升／分钟
    溶剂：四氢呋喃
    检测器：RI(示差)
    定量方式：外标法
    用上面的条件，我们对一系列含量不同的单甘酯样品进行定量。
    四、结果与讨论
    应用GPC的方法，测出一系列单甘酯样品的含量，并和化学分析方法的结果对比。
    从中可以看出， 凝胶色谱法比化学法测出的单甘酯含量都来得高， 其主要原因正是由于化学法不能测出β位单甘酯的缘故， 造成结果偏低 从色谱图我们可以看出，若需要，改变实验条件，还有可能将三甘酯、双甘酯进一步分离， 实现对双甘酯、三甘酯的定量。综合上面的工作，得出如下结论：
    1．用硅胶层析柱可以从粗甘酯中分离出高纯度的单甘酯， 从色谱囤可以看出， 得到的单甘酯没有杂峰， 并且峰形对称， 并经必要的仪器分析， 说明其纯度是可信的， 可以作为标样。
    2．以凝胶色谱法定量分析单甘酯，实验操作简便、快速、灵敏， 重现性好。在本实验条件下， 单甘酯与混合物中其它成份的分离效果是理想的， 可用于单甘酯的定量分析。
参考文献
[1]Kanfman H．P．， 《油脂、肥皂、涂料》73，38，1971。
[2]Berner G.J.，《色谱分析》64，388，1972。