摘要：目的:采用HPLC方法测定三七药材中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量。方法：色谱条件，以Kromasil C18柱(4.6mm×250mm，5um)为色谱柱，以乙腈-0.05％磷酸(25：75)为流动相，检测波长203nm；流速1.5mL/min。结果人参皂苷R1在O.52～10.36ug内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.99992，n=7)，三七皂苷R1在O.2O～4.05ug内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.99998，n=7)。人参皂苷Rgl的回收率为97.4％～98.9％(n=9)，三七皂苷Rl的回收率为93.6％～96.O％(n=9)。结论本方法分离度好，快速，简便，重现性好，可用于三七药材的质量控制。
关键词：三七；人参皂苷Rg1；三七皂苷R1；含量测定；高效液相色谱法
中药三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk．)F．H．Chen的干燥根，是我国传统名贵中药。具有散瘀止血，消肿定痛等多种功效。近年来三七的药理研究已取得显著进展，其中三七总皂苷具有耐缺氧、降血糖血脂、改善微循环、增强机体免疫力、抗炎、抗衰老等多方面的生理活性。三七总皂苷主要含人参皂苷Rbl、人参皂苷Rgl和三七皂苷R1三种主要活性成分。目前三七药材中各组分的含量测定方法已有一些报道。《中国药典》一部(2000年版)系应用薄层扫描法对三七中所含的人参皂苷Rbl和人参皂苷Rg1进行定量控制。本实验研究采用HPLC法测定三七药材中人参皂苷Rgl和三七皂苷R1的含量。结果表明本法简便，快速，重现性好。
1 仪器与试药
1．1 仪器
LC-6A高效液相色谱仪，SPD-6AV紫外检测器，C-R4A数据处理机(日本岛津公司)。
1．2 试药
三七药材Panax notoginseng(Burk)F．H．Chen，购于云南玉溪万方药厂，产地云南红河州；人参皂苷Rgl，三七皂苷R．对照品(供含量测定用)均购自中国药品生物制品检定所；乙腈：Fisher Scientific公司，HPLC级；磷酸为分析纯。
2 方法与结果
2．1 色谱条件
色谱柱：Kromasil Cl8柱(4.6mm×250mm，5um)；流动相：乙腈-0.05％磷酸(25：75)；检测波长203nm；流速1.5mL/min；柱温40℃。柱效以人参皂苷Rgl计，理论塔板数应不低于2500。
2．2 供试品溶液的制备
精密称取三七药材粉末(过三号筛)约1.5g，置500mL烧瓶中，加乙醚100mL，置水浴上加热回流1h。弃去乙醚并挥干，粉末加甲醇80mL，加热回流2次，每次lh。过滤，合井滤液，减压浓缩至干。残留物分次加水使溶解，置50mL量瓶中，加水至刻度，微孔滤膜(0.45μm)滤过。精密吸取5mL，置25mL量瓶中，加水至刻度，备用。
2．3 标准曲线制备
分别精密称取60℃真空干燥2h的人参皂苷Rgl和三七皂苷R．对照品约25mg和10mg于50mL量瓶中，加水溶解并定容，作为对照品储备液。精密吸取对照品储备液0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL于10mL量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，微孔滤膜(0.45um)滤过。取续滤液20μL进样，记录色谱图，分别以峰面积对进样量回归分析，得到人参皂苷
Rgl和三七皂苷R1的线性回归方程分别为：
Y=6.327×0.000001X一0.08553．r=0.99992
Y=7.971×0.000001X一0.00803．r=0.99998
进样量范围分别为0.52～10.36ug和0.20～4.051ug。
2．4 稳定性试验
精密吸取供试品溶液l0uL分别于0，l，2，3，4h进样，记录峰面积，结果人参皂苷Rgl RSD=0.93％(n=5)，三七皂苷R1 RSD=1.22％(n=5)。
2．5 精密度试验
精密吸取供试品溶液l0uL进样，记录峰面积，连续5次。人参皂苷Rgl RSD=0.54％，三七皂苷R1RSD=0.38％。
2．6 重复性试验
用同一规格的三七药材按2．2法提取制备5份供试品溶液。精密吸取供试品溶液1OuL进样，记录峰面积。人参皂苷Rgl RSD=1.44％，三七皂苷R1RSD=1.68％。
2．7 回收率测定
取已知含量的样品粉末(过三号筛)约1.0g，精密称定9份，分别精密加入一定量的人参皂苷Rg1和三七皂苷R1对照品．按2．2法制备，进样1OuL，记录峰面积并计算回收率。
2．8 样品测定
取6批样品，按2．2法操作，在上述色谱条件下，以外标法计算各样品中人参皂苷Rgl和三七皂苷R1的含量，同时以TLC法做比较。
3 讨论
3．1 流动相的选择
先后用了不同比例的流动相，经实验，认为用乙腈-0.05％磷酸(25：75)为测定人参皂苷Rgl和三七皂苷R1含量的流动相，即可排除干扰，又能使各组分达到基线分离的效果。且分析时间较短。
3．2 对比实验
与中国药典一部2000年版所述的薄层扫描法相比，本方法操作简便，精密度高，重现性好。对6个样品中人参皂苷Rg1的测定结果基本一致，而对三七皂苷R1的分析结果差距较大。薄层法结果偏高，高效液相法偏低，考虑这与薄层法误差较大有关。
