【摘要】就毛细管电泳法分析马齿苋中的二羟基苯丙氨酸的含量做一探讨，并讨论磷酸盐缓冲液浓度及SDS浓度对分离的影响。
    【关键词】毛细管电泳法；二羟基苯丙氨酸；缓冲液浓度
    Measuring the Content of the Effective Elements on Purlane with Capillary Electrophoretic Method
Zhang Wen-dian，YAO Gang-qian
    【Abstract】An analysis on the content of the effective elements in purslane by capillary electrophonetic method is made，and a discussion is made on the density of phosphate amortizing fluid and also the effect of SDS density to the separation．
    【Key words】capillary electrophonetic method；dihydric-denzyl-trotyl amino acid；density of phosphate amortizing fluid
    马齿苋(Portulaca oleracea L．)基原为马齿苋科植物马齿苋的全草，异名马齿草、五行草、马齿菜。民间用其治疗细菌性痢疾、急性肠胃炎，也有预防心脏病及抗衰老的功效，其中二羟基苯氨酸为有效成分之一。目前马齿苋的分析方法主要为气相色谱一质谱联用法、气相色谱法、液相色谱法，这些方法在应用上都有局限性。毛细管电泳是近年来发展起来的一种重要分离分析技术，本实验采用胶束毛细管电泳法，测定马齿苋中的二羟基苯丙氨酸的含量，实验结果良好。
    一、实验部分
    1．仪器与试剂
    毛细管电泳仪；计算机Compaq Prolinea 4／50型；Phs-3C型精密pH计；熔硅毛细管(58.2cm×7μmi．d．，有效长度50.6cm)；化学对照品二羟基苯丙氨酸由中国药品生物制品鉴定所提供；马齿苋为自己采集的新鲜样品；分析纯磷酸盐；表面活性剂SDS；水为双蒸水，其他试剂均为分析纯。
    2．实验方法
    进样前，毛细管首先在室温下，依次用O.5mol／L，0.1mol／L的NaOH及双蒸水各冲洗5分钟，再用背景缓冲液清洗1O分钟，最后施加20kV电压预平衡1O分钟，每进样5次后需清洗毛细管，步骤同上。样品采用重力自动进样，进样时间5秒，214nm紫外检测，进毛细管柱的所有试液均用超滤膜过滤。
    二、结果与讨论
    在优化实验条件下，利用马齿苋的鲜品，索氏提取3小时，反复提取3次，合并提取液，浓缩。利用毛细管电泳法测定马齿苋中的有效成分含量，得电泳图谱，重复，在相同条件下得电泳图谱，经比较，重现性良好。
    1．磷酸盐缓冲液浓度对分离的影响
    用配置好的磷酸盐系列浓度1O，20，3O，40，50mmol／L作为缓冲液进行分离马齿苋样品可知，当浓度较小时，谱峰较宽，迁移时间短；当浓度较大时，迁移时间延长。实验结果表明，选磷酸盐浓度为30mmol／L，可以获得短的迁移时间和较好的分离效果。
    2．SDS浓度对分离的影响
    单独使用30mmol／L磷酸盐缓冲液，马齿苋中二羟基苯丙氨酸能从其他成分中分离出来，但未知组分有重叠，因此我们选用胶束毛细管电泳法。实验时，固定磷酸盐的浓度为5mmol／L，改变SDS浓度为5，1O，15，20，25，30mmol／L，从实验结果看，SDS浓度为5mmol／L时，低于临界胶束浓度8.1mmol／L，谱峰分不开，而SDS浓度太高时，造成基线不稳，噪声也随之增大，迁移时间延长，因此本实验采用含15mmol／LSDS和30mmol／L磷酸盐作为缓冲液(pH9.0)。
    3．标准曲线的绘制
    精密称取适量的二羟基苯丙氨酸对照品，制成不同浓度的标准溶液，在最佳分离条件下进行测定，以二羟基苯丙氨酸的矫正峰面积对浓度作图，结果二羟基苯丙氨酸在0.098～3.46mg／ml范围内显线性关系，线性回归方程为Y=0.027+3.65X，r=0.999。
    4．样品的测定
    精密称取马齿苋2.83g，索氏提取3小时，提取液减压蒸馏至10mL。将制得的样品试液在最佳分离条件下运行，测得样品中二羟基苯丙氨酸的含量(g／g)为0.76％，RSD2.18％(n=3)。
    通过实验认为采用胶束毛细管电泳法，测定马齿苋中的二羟基苯丙氨酸的含量，具有样品处理简单，操作快捷方便的特点，适合于中药分析测定。
[参考文献]
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