独活配方颗粒以独活饮片为原料，经水提取、浓缩、喷雾干燥而制成的颗粒，临床供配方用。文献报道，独活含有萜类及蛇床子素等香豆素类成分，其萜类成分的含量测定报道较多，而蛇床子素的含量测定报道较少。中国药典2000年版一部采用薄层扫描法测定蛇床子素的含量，方法比较繁琐，重现性差。本文采用高效液相色谱法测定独活药材及配方颗粒中蛇床子素的含量，方法简便，重现性好，无干扰，取得满意效果。

1 仪器与试药：Waters 600E高效液相色谱仪(美国Waters公司)；Kro masil C。。色谱柱(中国科学院大连化学物理研究所)；Waters2487双通道紫外一可见检测器(美国Waters公司)；JS．3030色谱工作站(大连江申分离技术公司)；超声清洗机(无锡超声电子设备厂)；甲醇为色谱纯；水为高纯水；其它试剂均为分析纯。
    蛇床子素对照品：中国药品生物制品检定所提供。独活药材：经本公司化验室唐波药师鉴定为伞形科植物重齿毛当归Angelica pubescens Maxim．f．biserrata Shan et Yuan的干燥根。
    独活配方颗粒：由江阴天江药业有限公司提供。

2 方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：Kromasil C18(中国科学院大连化学物理研究所)；流动相：甲醇-水-磷酸(375：125：1)；检测波长：322nm；柱温：室温；流速：1．0 mL/min。

2．2 标准曲线及线性关系：精密称取在60℃减压干燥4 h的蛇床子素对照品3．50 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得(35．0μg/mL )，作为对照品溶液。在已选定的条件下分别精密吸取2，4，6，8，10 μL进样，按色谱条件测得峰面积积分值，以峰面积积分值为纵坐标，蛇床子素进样量为横坐标。结果，蛇床子素进样量在0．070～0．350μg范围内，进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系，回归方程为Y=943311X一6924，r=0．9999，n=5。

2．3 精密度考察：精密吸取蛇床子素对照品溶液(35．0μg/mL )10μL ，重复进样5次，蛇床子素峰面积积分值的RSD<2％ 。

2．4 重复性试验：取同一批号样品，按样品测定法重复测定5次，得平均含量，为0．775 mg/g，计算RSD为1．20％ 。

2．5 回收率试验
2．5．1 对照品溶液的制备：精密称取在60℃减压干燥4h的蛇床子素对照品1O．2O Hlg，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得(1．02 mg/mL )，作为对照品溶液。
2．5．2 取已知含量的样品(批号0302110)1 g，精密称定，分别加入蛇床子素对照品1 mL，按样品测定法进行测定，得回收率，计算平均回收率98．30％ ，RSD为0．90％。

2．6 样品测定
2．6．1 配方颗粒含量测定：取样品约1 g，精密称定，置25 mL量瓶中，加甲醇2OmL，超声处理30 min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，离心，取上清液1OμL注入液相色谱仪测定，得峰面积。由标准曲线计算蛇床子素含量。根据结果，暂定独活配方颗粒中蛇床子素的含量不得少于0．50 mg/g 。
2．6．2 独活药材含量测定：取独活粗粉0．1 g，精密称定，同配方颗粒含量测定方法制成供试液，取上清液1O L，注入液相色谱仪测定，得峰面积，由标准曲线计算蛇床子素含量。
中国药典2000年版一部独活药材的含量要求含蛇床子素不得少于0．30％ ，结果均符合规定。

3 讨论
3．1 独活配方颗粒采用水提取工艺，蛇床子素为香豆素类成分，水溶性差，从药材到配方颗粒，转移率较低，若要提高配方颗粒中蛇床子素的含量，应考虑以稀醇为溶煤。
3．2 实验建立的高效液相色的谱法，使药材及配方颗粒样品在分离分析时，蛇床子素色谱峰与其他峰均达到基线分离。该法简便、快速，准确度高，重现性好，可以作为独活药材及配方颗粒的质量控制方法。