淫羊藿为小檗科植物，主要功效为补肾阳，强筋骨，祛风湿。因此，淫羊藿甙在补肾壮阳的保健食品中常是主要的功能因子。关于淫羊藿甙的测定，保健食品方面尚无检验方法，药典对其甙类的检测是薄层色谱法，需铺板，试样萃取，减压蒸馏浓缩，最后用分光光度法测定，既繁琐误差又大。所以本文利用高效液相色谱法对保健食品中淫羊藿甙的测定进行了研究。
1　材料与方法
1.1　仪器：　Shimadzu LC-6A高效液相色谱系统；SPD-6AV紫外检测器；C-R2A数据处理系统；C18柱（4.6 mm×200 nm, 5u），CSF-3A超声波发生器。
1.2　试剂：
　    标准溶液：精密称取淫羊藿甙标准品5.0 mg，用甲醇(优级纯)溶解并定容为10.0 mL，此溶液浓度为0.5 mg/mL。该溶液用甲醇稀释5倍，即为0.1 mg/mL的标准使用液。
2　仪器条件
    流动相：甲醇+水（55+45）；流速0.8 mL/min；检测波长270 nm,0.02AUFS。柱温40℃，流动相过0.45 nm滤膜。
3　测定方法
3.1　试样处理［6］：取粉碎的固体试样4.0 g，加入70%乙醇40 mL，超声30 min后过滤。用少量70%乙醇洗涤残渣，收集滤液，定容至50 mL，为试样处理液。
3.2　测定：取上述试样处理液1 mL，用70%乙醇稀释至5 mL，过0.45μm滤膜，进样5μL，在上述仪器条件下分析，测定峰面积。　　取标准使用液5μL，在同一色谱条件下分析，以相对保留时间定性，峰面积定量。
3.3　计算x=(h1×C×V×5×100)/(h2×m)　　x试样中淫羊藿甙的含量，mg/100 g；h1试样峰高或峰面积；C标准溶液浓度，mg/mL；V试样定容体积，mL；h2标准溶液峰高或峰面积；m试样量，g。
3.4　色谱图
　4　结果与讨论
4.1　波长的选择
    　对淫羊藿甙标准溶液，进行紫外光谱扫描，其最大吸收波长为270 nm，因此选择270 nm进行检测具有较高灵敏度。４.2　流动相配比的选择
    　增加流动相中甲醇的比例，会使出峰时间缩短，但由于保健食品成分复杂，为排除杂质干扰，当流动相配比为55+45时，保留时间为12.45 min，淫羊藿甙峰的周围无其它干扰。如图所示。4.3　方法的线性范围及最小检出限　
    分别配制浓度为0.025,0.050,0.075,0.100,0.125 mg/mL淫羊藿甙标准溶液，在同样色谱条件下分析，以浓度对峰面积作校正曲线，得线性回归方程和相关系数分析为y=3822.399x+755,r=0.9999。本方法最小检出限为0.03μg。表1　精密度试验结果　n=6　　　mg/100 g
试样号 1 2 3 4 5 6 　 RSD %
1 0.0127 0.0123 0.0129 0.0121 0.0122 0.0127 0.0125 2.6
2 0.0091 0.0110 0.0101 0.0103 0.0105 0.0100 0.0102 6.2
3 0.0115 0.0116 0.0111 0.0113 0.0113 0.0114 0.0114 1.5
4.4　准确度
    　根据试样测定步骤，做两个浓度加标回收试验，每个浓度做6个平行样，低浓度（0.03mg/mL）平均回收率为97.8%～102.4%，高浓度（0.125 mg/mL）平均回收率为97.5%～101.8%。4.5　精密度　选择3种含淫羊藿甙的保健食品，分别测定6次，结果见表1。4.6　稳定性试验　从表2可以观察出方法的稳定性非常好，这与淫羊藿甙本身化学性质比较稳定有关。表2　稳定性试验结果
　 第一次 第二次 第三次 第四次 RDS　%
1999.4.20 1999.4.21 1999.4.22 1999.6.40 　
试样1 0.0127 0.0124 0.0126 0.0125 1.02
试样2 0.0091 0.0101 0.0100 0.0091 5.7
　　由于此类保健食品，成分复杂，有时含有其它甙类、黄酮类、叶绿素、防腐剂等，本实验进行了空白试验，对未加淫羊藿甙的同种试样进行了上述方法的测定，结果无干扰，见图谱。
5　结论　
    　应用高效液相色谱法测定保健食品中的淫羊藿甙，方法简便，干扰少，精密度及准确度均较满意（回收率为97.5%～101.8%,RSD为2.6%～6.2%），有较强的实用性。