倍连软膏由黄连、五倍子组成，具有清热、燥湿、敛疮的功效，主治新生儿尿布疹、褥疮。其中黄连为该处方中的主药，而小檗碱又是黄连的主要有效成分之一，文献中曾有用分光光度法与薄层扫描法进行中药制剂中盐酸小檗碱含量测定法的报道。作者以黄连中的小檗碱作为质量控制指标成分，对该药进行含量测定的研究。本实验所建立的薄层扫描法具有良好的专属性、准确度和重现性，并且操作简便，可用于该制剂的含量测定。
1 仪器与试药
CD-60双波长型薄层扫描仪(德国DESAGA公司)；GF254高效硅胶板(德国Merck公司)；盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号0713-9906，供含量测定用)；倍连软膏(浙江大德药业集团生产，每支30g)；所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2．1 薄层色谱条件 硅胶G薄层板，以苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(6：3：1.5：1.5：0.3)为展开剂，另槽加入等体积的浓氨试液，预平衡15min后，上行展开8cm，取出。
2．2 薄层扫描条件 单波长反射法锯齿扫描，检测波长366nm。
2．3 对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1mL含40μg小檗碱的溶液，作为对照品溶液。
2．4 供试品溶液的制备 取本品5g，精密称定，加乙醚(50，50，40，40mL)超声提取(20，20，15，15min)4次，离心(1000～2 000r/min)，弃去上清液，残渣挥干乙醚，置100mL量瓶中，加入盐酸．甲醇(1：100)约95mL，60℃水浴中加热15min，取出，加热超声处理30min，室温放置过夜，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，滤液作为供试品溶液。
2．5 线性关系的考察 精密吸取盐酸小檗碱对照品(38μg/mL，折合成小檗碱为34μg/mL)甲醇溶液，点样量为1，2，3，4，5，6μL按上述条件展开，扫描。以扫描面积值为纵坐标；点样量为横坐标，绘制标准曲线，结果表明，此曲线不通过原点，且小檗碱于0.038～0.228μg呈良好线性关系。回归方程为Y=14714.60X+651.74，r=0.9911。
2．6 精密度试验 精密吸取同一样品溶液1μL，点于同一硅胶G板上，共点5点，按上述条件展开，扫描，测得斑点面积值，结果RSD为1.3％。同一样品在5块不同的薄层板上以相同的条件展开，挥干，扫描，结果RSD为2.7％。
2．7 重复性试验 分别对同一个斑点反复扫描5次，结果RSD为2.2％。按拟定的方法对同批样品进行5次独立测定，结果RSD为2.6％。
2．8 稳定性试验 取样品溶液点样，以上述条件展开，挥干后每30min测定扫描1次，结果RSD为3.3％。表明斑点在3.5 h内基本稳定。
2．9 回收率试验 取已测定含量的供试品5g，直接精密称取加入小檗碱对照品适量，按拟定的方法进行回收率试验.
3 样品的测定
取样品3批，按上述的含量测定方法测定制剂中小檗碱的含量，结果为1.6，1.4，1.3mg/g。
4 讨论
4．1 吸附剂展开剂的选择对于展开剂作了多种比较：①正丁醇-冰醋酸-水(7：1：2)，主斑点分离不佳，斑点不明显；②醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10：7：1：1)，主斑点分离不佳，斑点不明显；③苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(6：3：1.5：1.5：0.3)，结果分离效果好，斑点清晰，明显，底色较淡。因此选用文中所用的展开剂。
4．2 提取方法的选择对乙醚超声提取的次数进行考察，发现超声提取4次已基本去除基质，溶液澄清。
4．3 该含量测定方法具有良好的专属性、准确度和重现性，并且操作简便，可用于倍连软膏的含量测定。