第１９卷第４期分析测试学报
　　Ｖｏｌ．１９Ｎｏ．４      
　　２０００年７月ＦＥＮＸＩＣＥＳＨＩＸＵＥＢＡＯ
　　（ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ）
　　(中山大学化学与化学工程学院，广东广州５１０２７５)                 
　　摘要:设计并制备了３，５＿二硝基苯甲酰基取代的β＿环糊精薄层色谱键合固定相，用于拆分丹磺酰化氨基酸对映体。该键合相合成方法简单，性能稳定，适用于正相和反相液相色谱。以乙腈-１%（φ）乙酸三乙胺-乙酸为展开系统，８对丹磺酰化氨基酸对映体得到良好分离，对映异构体之间的相对比移值α为１．１８～１．６３。该文对色谱拆分机理及色谱分离条件进行了较详细的讨论。
　　文章编号:１００４-４９５７(２０００)０４-０００８-０４
  　　氨基酸对映体的分离分析是研究生命科学的基础，在蛋白质多肽的研究、有机化学中的不对称合成以及医药、食品、卫生等领域都具有重要意义。分离分析氨基酸对映体的方法主要有手性配体交换［１，２］和与β＿环糊精(β＿ＣＤ)形成包埋络合物［３］。
　　β＿ＣＤ的羟基用不同的基团修饰后，能与更多的手性分子形成包埋络合物，并能增强β＿ＣＤ与手性分子之间的作用力，有利于手性分离。氨基酸对映体通常在色谱分离前需进行衍生化，衍生化的氨基酸对映体更适合于色谱分离，而且还能提高样品的检测灵敏度。
　　在以主-客体包埋络合的β＿ＣＤ为手性选择固定相的手性分离中，氨基酸对映体的手性拆分与衍生化试剂的类型密切相关。本研究用丹磺酰氯(ＤＮＳ＿Ｃｌ)衍生化氨基酸对映体，在氨基酸对映体手性中心的氨基上引入了与β＿ＣＤ空腔大小相匹配的二甲氨基萘磺酰基，使衍生化的氨基酸对映体能与β＿ＣＤ形成稳定的包埋络合物。
    用３，５＿二硝基苯甲酰氯修饰β＿ＣＤ的羟基，制备了３，５＿二硝基苯甲酰基取代的β＿ＣＤ薄层色谱固定相，以乙腈-１%（φ）乙酸三乙胺(ＴＥＡＡ)-乙酸为展开系统，８对ＤＮＳ＿氨基酸对映体得到完全分离，对映异构体之间的相对比移值α(α＝Ｒｆ（Ｄ）／Ｒｆ（Ｌ）)为１．１８～１．６３。１实验部分１．１试剂和药品硅胶Ｈ(薄层层析用，１０～４０μｍ)，青岛海洋化工厂产品，用３ｍｏｌ／Ｌ的稀盐酸浸泡过夜后用蒸馏水洗至中性，于１１０℃真空干燥(五氧化二磷为干燥剂)１２ｈ后置于干燥器中备用;β＿ＣＤ纯度为９９%，陕西佳县生物化学工业公司产品，用蒸馏水重结晶后，于１１０℃真空干燥(五氧化二磷为干燥剂)１２ｈ后置于干燥器中备用;３＿缩水甘油基氧丙基三甲氧基硅烷(ＧＰＴＳ，也称ＫＨ-５６０，ＣＰ)，南京曙光化工厂产品，减压蒸馏，收集１４４～１４８℃（２．０ｋＰａ）的馏分备用;Ｎ，Ｎ＿二甲基甲酰胺(ＤＭＦ，ＡＲ)，广州化学试剂厂产品，经无水硫酸镁干燥后，减压蒸馏，收集３８～４０℃（２．０ｋＰａ）的馏分备用;Ｄ，Ｌ＿丙氨酸(Ａｌａ)，天津市东方卫生材料厂产品;Ｌ＿Ａｌａ，第二军医大学药学系合成药物研究室提供;Ｄ，Ｌ＿亮氨酸(Ｌｅｕ)、Ｄ，Ｌ＿苯丙氨酸(Ｐｈｅ)为第二军医大学朝晖制药厂产品;Ｌ＿Ｌｅｕ、Ｌ＿谷氨酸(Ｇｌｕ)、Ｄ，Ｌ＿赖氨酸(Ｌｙｓ)、Ｌ＿Ｌｙｓ为上海康达氨基酸厂产品;Ｄ，Ｌ＿异亮氨酸(Ｉｌｅ)、Ｌ＿Ｉｌｅ、Ｌ＿Ｐｈｅ、Ｄ，Ｌ＿天冬氨酸(Ａｓｐ)由中国科学院生物化学研究所提供;Ｄ，Ｌ＿ｎｏｒ＿缬氨酸(Ｖａｌ)，ＢｏｒａｔｏｒｙＣｈｅｍｉｃａｌ产品;Ｄ，Ｌ＿Ｇｌｕ，上海试剂三厂产品;Ｌ＿Ａｓｐ，上海生化所东风生化技术公司提供;Ｄ，Ｌ＿丝氨酸(Ｓｅｒ)，北京化工厂产品;Ｌ＿Ｓｅｒ，上海化学试剂采购供应站提供;丹磺酰氯，Ｓｉｇｍａ公司产品;３，５＿二硝基苯甲酰氯(ＣＰ)，上海名鹤农药化工厂产品;其他试剂均为分析纯。１．２薄层色谱分析１．２．１氨基酸对映体的衍生化［１］将适量的氨基酸溶于０．１ｍｏｌ／Ｌ碳酸氢钠溶液中，取１ｍＬ此溶液与１ｍＬ１５ｍｍｏｌ／Ｌ丹磺酰氯的无水丙酮溶液室温避光反应２ｈ，用乙醚萃取除去过量的丹磺酰氯，水层用０．２ｍｏｌ／Ｌ