HPLC法测定胃炎康胶囊中芍药苷的含量
作者：秦文杰，马 开，高 寒 来源：中国实验方剂学杂志
摘要：目的：建立高效液相色谱法测定胃炎康胶囊中芍药苷含量的方法。方法：采用ODS C18色谱柱；乙腈-水(20：80)为流动相；流速：lmL／min；柱温：40℃；检测波长230nm。结果：芍药苷在0.1116μg～0.58μg范围内量与峰面积积分值成良好的线性关系。平均回收率为100.35％；RSD为1.54％。结论：该法简便、准确，可作为胃炎康胶囊的含量测定方法。
关键词：胃炎康胶囊；高效液相色谱法；芍药苷
胃炎康胶囊已有部颁标准。原标准中无含量测定项，为了更好的控制产品的内在质量，采用高效液相色谱法对其中的芍药苷进行含量测定。在选择供试品溶液的制备方法过程中，我们发现用水作为提取溶剂，无论药材还是成品所测得芍药苷的提取率均较高。而在众多芍药苷含量测定的文献报道中。用水作为提取溶剂的方法尚未见报道，现报道如下。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪(日本岛津CLASS-VP 1OAVP)，KT-350W型超声提取器(济宁科特超声电子有限责任公司)，ODS C18色谱柱(4.6×250mm)(大连依利特)，试剂：所用试剂均为分析纯、色谱纯，水为重蒸馏水(自制)，对照品：芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所提供)。胃炎康胶囊(河南仲景健药业有限公司)。
2 方法与结果
2．1 色谱条件与系统适用性试验ODS C18色谱柱；乙腈-水(20：80)为流动相；流速：lmL／min；柱温：40℃；检测波长230nm，进样量1OμL。理论板数按芍药苷峰计算，应不低于2000。
2．2 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含60μg的溶液，即得。
2．3 供试品溶液的制备取本品内容物1.5g，精密称定，置50mL量瓶中，加水45mL超声提取30min，放至室温，加水至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液5mL置10mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。
2．4 阴性对照溶液的制备 按处方比例称取除白芍外的其他药材，同法制得阴性对照溶液。
2．5 干扰试验 照上述色谱条件，分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液，注入色谱仪，记录色谱图，从图中可见空白试验无干扰。
2．6 线性关系考察 精密称取芍药苷对照品，加甲醇溶液，制成每lmL含55.8μg的对照品溶液，分别进样2、4、6、8、10μL，按上述色谱条件，测定芍药苷峰面积积分值，回归方程为：Y=6.78×0.0000001X-0.00477，r=0.99976。
2．7 稳定性试验 照上述色谱条件，每隔一定时间进样一次，记录峰面积，结果表明，供试品溶液在8h内基本稳定，峰面积RSD为1.5％。
2．8 精密度试验 按2．2．2方法制备供试品溶液，重复测定6次，峰面积RSD为1.11％。
2．9 重复性试验 取同一批样品，平行制备5份供试液，分别进行含量测定，RSD为1.86％。
2．10 回收率试验：精密取已知含量的同一批样品5份(批号：021105；含量：2．3261mg／g)0.75g，分别精密加入芍药苷对照品1.7mg，按2．2．2方法制备供试品溶液，测定，计算回收率。
2．1l 样品含量测定 按2．2．2方法制备供试品溶液，取供试品溶液和对照品溶液，分别进样，测定3批样品中芍药苷含量。
3 讨论
3．1 供试液的制备我们曾选用乙醇、甲醇⋯浸泡4h。超声处理30rain、75％乙醇、50％乙醇、70％甲醇、50％甲醇、30％ 甲醇、水饱和正丁醇 、水直接超声，结果以水超声提取含量最高，故选用以水超声提取来制备供试品溶液。
3．2 流动相的选择 我们曾先后选用① 甲醇一0.05mol／L磷酸二氢钾溶液-醋酸-异丙醇(67：173：4：4)，② 甲醇-水( 30：70)，③ 乙腈-1％磷酸溶液(15：85)，④ 乙腈-水(20：80)，⑤ 甲醇-水-乙腈(10：75：15)为流动相，因以乙腈-水(20：80)为流动相色谱分离度好，色谱峰不拖尾，且配制简单，故选用乙腈-水(20：80)为流动相。
3．3 我们采用反相ODS C18色谱柱，乙腈-水(20：80)为流动相，流动相中水的比例较大，经测定，本实验结束前后，柱效未见降低，在本实验中，以水直接进样，对分析柱寿命未见明显影响。
3．4 我们用此提取方法分别以本文色谱条件和药典色谱条件进行了多次实验比较，结果不同批次白芍药材和胃炎康胶囊中芍药苷提取率均较药典方法高1.5～2倍。结果说明本法较药典方法提取完全，更能客观反映白芍及其制剂中芍药苷的含量。
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