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提要 用HPLC方法对中药复方制剂清经胶囊中小檗碱进行含量测定，并进行了方法的广泛适应性试验，结果表明小檗碱在0.115～0.575
μg范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系，方法回收率为98%。精密度与准确度均较满意。该法可有效地控制其内在质量。
关键词 HPLC 清经胶囊 小檗碱
DETERMINATION OF
BERBERINE IN QINGJING
CAPSULES BY HPLC Yu Ping Hu Ping He
Qiang
(Sichuan Enwei Traditional Chinese Medicine Institute Chengdu 610041) ABSTRACT This paper described the content determination on berberine within
Qingjing capsules of traditional medicine compounds by HPLC method, which also carried out
a adaptability test in a wide-ranging.The results showed that within 0.115～0.575 μg, berberine kept a
fine line relationship between concentration and peak area. The average recovery rate in
sample was about 98%. The precision and accuration were both satisfactory, and the method
can control quality effectively.
Key Words HPLC Qingjing capsules Berberine 清经胶囊是由牡丹皮、黄柏等数味中药材研制而成的中药复方制剂。具有清热凉血、滋肾养阴、调经止痛等功效。为制定本品质量控制标准，对其中小檗碱的含量测定方法进行了研究。该法回收率高、分离度好、方法简便、适应性好，适于清经胶囊生产的质量控制。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
惠普HP1100高效液相色谱仪，G1315A二极管阵列检测器(DAD)，G1316柱温箱(Quatpump),G1322A在线真空脱气机(Degasser),G2170AA
HP化学工作站(HP Chemstation);Waters高效液相色谱仪，486检测器，515 HPLC
pump，temperature control module, PC800图谱及数据处理系统；波达1004超声清洗器；TGL-16G台式高速离心机。盐酸小檗碱(berberine)对照品(中国药品生物制品检定所)；供试品(自制)；乙腈为色谱纯；其它试剂均为分析纯；流动相用水为高纯水(西南物理研究所)。
1.2 方法结果
1.2.1 色谱条件 ODS色谱柱，流动相用乙腈-水-磷酸二氢钾-十二烷基硫酸钠(500
ml∶500 ml∶3.4 g∶1.7 g)，检测波长346 nm。
1.2.2 方法可行性考察 精密称取盐酸小檗碱对照品适量，用甲醇溶解配制成0.02
mg/ml的对照品溶液，取空白样品(缺黄柏)和供试品分别制备成空白对照溶液和供试品溶液，在上述色谱条件下测得三种溶液的HPLC图谱(图1)。由图谱可见，小檗碱最大吸收为346
nm，且小檗碱与巴马汀色谱峰能达到基线分离，空白样品在此波长无吸收。故选择346
nm作为清经胶囊中小檗碱含量的检测波长。
Fig 1 High performance liquid chromatogram
of berberine
A Palmatine B Blank C Berberine D Sample
a peak of berberine b peak of palmatine 1.2.3 标准曲线的绘制 分别吸取对照溶液2.5、5.0、7.5、10.0、12.5
μl注入色谱仪。以峰面积积分值对进样浓度进行回归，得回归方程C=0.0001944A+0.003827，r=0.9998(式中C为盐酸小檗碱的量μg，A为峰面积积分值)。可见，进样量在0.115～0.575
μg范围内线性关系良好，标准曲线基本过原点。故在实际含量测定中，可采取随行标准法(中国药典1995年版一部附录VID)计算供试品小檗碱的含量。
1.2.4 供试品提取条件的考察 取装量差异测定项下颗粒，研细，取细粉约0.1
g，精密称定，置25 ml量瓶中，加入提取液20 ml，超声提取30 min；取出放冷后用提取液稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液适量高速离心(12
000 r/min)5 min；取其上清液10 μl，注入色谱仪，按标准比较法计算其含量(表1)。 Table 1 Results for determination
by different extracting solvents(n=3) | 
