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提要 采用RP-HPLC测定天乐口服液中橙皮苷的含量，以μ-Bondapak
C18柱(10 μm，4.6 mm×250 mm)为固定相，2%甲醇的乙腈溶液-0.1% 磷酸和0.1%三乙胺的水溶液(20∶80)为流动相进行测定，紫外检测波长284
nm，平均回收率为99.95%，RSD=0.93%(n=6)。
关键词 天乐口服液 橙皮苷 RP-HPLC
QUANTITATIVE DETERMINATION OF
HESPERIDIN IN
TIANLE ORAL LIQUID BY RP-HPLC Zhan Shiqin Li Kaimin Zhou Shaofen
(Chongqing Institute for Drug Control Chongqing 410015) ABSTRACT The content of hesperidin in Tianle oral liquid was determined by
RP-HPLC. Hesperidin was separated by μ-Bondapack C18
colunm(10 μm, 4.6 mm×250 mm).The mobile phase
consisted of 2% methanol acetonitrile-0.1% phosphoric acid and 0.1% triethylamine aqueous
solution(20∶80). The detection was at 284 nm. The
average recovery was 9.95%, RSD=0.93%(n=6).
Key Words Tianle oral liquid Hesperidin RP-HPLC 天乐口服液是由太子参、白术、陈皮等10味药材制成的复方制剂，具健脾开胃，消食导滞之功效，用于小儿脾胃虚弱、厌食等症。实验采用RP-HPLC测定天乐口服液中橙皮苷含量，操作简便，被测组分分离完全，测定结果准确、可靠。
1 实验部分
1.1 仪器与试药
日本岛津LC-10AD高效液相色谱仪，SPD-10A紫外可见检测器，C-R3A数据处理机；岛津UV-260型可见紫外分光光度计；TGL-16B高速台式离心机。橙皮苷对照品(自制，含量99.52%)；乙腈(色谱纯，上海生化化工助剂厂)；其余化学试剂均为分析纯。
1.2 检测波长的选择
取橙皮苷对照品，用所选流动相作溶剂，制成适宜浓度，在200～400 nm波长范围内测定吸收光谱，橙皮苷在流动相中的最大吸收波长为284
nm。
1.3 色谱条件
经多次试验，选择μ-Bondapak C18柱(10μm,4.6
mm×250 mm，大连物化所)；以2%甲醇的乙腈溶液-0.1%磷酸和0.1%三乙胺的水溶液(20∶80)为流动相；流速1.2 ml/min；柱温40℃；检测波长284
nm。
在上述条件下由橙皮苷对照品，缺陈皮供试品(空白)、及天乐口服液供试品的色谱图(图1)可见，被测成分分离完全，供试品中共存组分不干扰橙皮苷的测定。
Fig 1 HPLC chromatogram of Tianle
oral liquid
A Hesperidin B Blank C Tianle oral liquid 1.4 标准曲线测定
1.4.1 对照品溶液的配制 取橙皮苷对照品约10
mg，精密称定，置200 ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取适量，用甲醇稀释成每1
ml中含6、12、18、24、30 μg橙皮苷对照品的溶液，经高速离心后即为对照品溶液。
1.4.2 标准曲线的测定 取不同浓度的对照品溶液，进样20
μl，记录色谱图。以峰面积与浓度绘制标准曲线，其回归方程为：
y=1897.9+38397.6x r=0.9999(n=6)。
结果表明，橙皮苷在6～30 μg/ml浓度范围内与峰面积有良好的线性关系。
1.5 回收率试验
分别取已测定含量的供试品6份，各加入一定量的橙皮苷标准溶液，按上述供试品的测定方法测定，计算加样回收率，结果见表1。
1.6 精密度考察
取橙皮苷对照品溶液20 μl，照上述色谱条件，按每次测定的峰面积值计算，测定结果为218090、217454、218173、219925、220323，平均峰面积值为218793，RSD=0.57%(n=5)。 Table 1 Results of recovery | 
