液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。
A、 峰拖尾
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原 因 |
解决方法 |
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1、筛板阻塞 |
1、a、反冲色谱柱
b、更换进口筛板
c、更换色谱柱 |
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2、色谱柱塌陷 |
2、填充色谱柱 |
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3、干扰峰 |
3、a、使用更长的色谱柱
b、改变流动相或更换色谱柱 |
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4、流动相PH选择错误 |
4、调整PH值。对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰 |
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5、样品与填料表面的溶化点发生反应
图 |
5、a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂
b、更改色谱柱 |
B、 峰前延
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原 因 |
解决方法 |
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1、柱温低 |
1、升高柱温 |
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2、样品溶剂选择不恰当 |
2、使用流动相作为样品溶剂 |
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3、样品过载 |
3、降低样品含量 |
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4、色谱柱损坏 |
4、见A1、A2 |
C、 峰分叉
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原 因 |
解决方法 |
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1、 保护柱或分析柱污染
图 |
1、取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。 |
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2、样品溶剂不溶于流动相 |
2、改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。 |
D、 峰变形
E、 早出的峰变形
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原 因 |
解决方法 |
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1、样品溶剂选择不恰当 |
1、a、减少进样体积
b、运用低极性样品溶剂 |
F、 早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
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原 因 |
解决方法 |
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1、柱外效应 |
1、a、调整系统连接（使用更短、内径更小的管路）
b、使用小体积的流通池 |
G、 K’增加时，脱尾更严重
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原 因 |
解决方法 |
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1、二级保留效应，反相模式 |
1、a、加入三乙胺（或碱性样品）
b、加入乙酸（或酸性样品）
c、加入盐或缓冲剂（或离子化样品）
d、更换一支柱子 |
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2、二级保留效应，正相模式 |
2、a、加入三乙胺（或碱性样品）
b、加入乙酸（或酸性样品）
c、加入水（或多官能团化合物）
d、试用另一种方法 |
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3、二级保留效应，离子对 |
3、加入三乙胺（或碱性样品） |
H、 酸性或碱性化合物的峰拖尾
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原 因 |
解决方法 |
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1、缓冲不合适 |
1、a、使用浓度50-100mM的缓冲液
b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液 |
I、 额外的峰
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原 因 |
解决方法 |
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1、样品中有其他组份 |
1、正常 |
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2、前一次进样的洗脱峰 |
2、a、增加运行时间或梯度斜率
b、提高流速 |
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3、空位或鬼峰 |
3、a、检查流动相是否纯净
b、使用流动相作为样品溶剂
c、减少进样体积 |
J、 保留时间波动
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原 因 |
解决方法 |
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1、温控不当 |
1、调好柱温 |
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2、流动相组分变化 |
2、防止变化（蒸发、反应等） |
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3、色谱柱没有平衡 |
3、在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱 |
K、 保留时间不断变化
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原 因 |
解决方法 |
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1、流速变化 |
1、重新设定流速 |
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2、泵中有气泡 |
2、从泵中除去气泡 |
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3、流动相选择不恰当 |
3、a、更换合适的流动相
b、选择合适的混合流动相 |
L、 基线漂移
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原 因 |
解决方法 |
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1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。） |
1、控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器
图 |
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2、流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。） |
2、使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。 |
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3、流通池被污染或有气体 |
3、用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用盐酸） |
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4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线） |
4、取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。 |
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5、流动相配比不当或流速变化 |
5、更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。 |
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6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 |
6、用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。 |
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7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 |
7、检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂 |
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8、样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。 |
8、使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。 |
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9、使用循环溶剂，但检测器未调整。 |
9、重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。 |
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10、检测器没有设定在最大吸收波长处。 |
10、将波长调整至最大吸收波长处 |
M、 基线噪音（规则的）
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原 因 |
解决方法 |
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1、在流动相、检测器或泵中有空气 |
1、流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。 |
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2、漏液
图 |
2、见第三部分。检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。 |
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3、流动相混合不完全 |
3、用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂 |
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4、温度影响（柱温过高，检测器未加热） |
4、减少差异或加上热交换器 |
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5、在同一条线上有其他电子设备 |
5、断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。 |
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6、泵振动 |
6、在系统中加入脉冲阻尼器 |
N、 基线噪音（不规则的）
